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八臂迷宫实验方法-仅供参考

更新时间:2023-11-21       点击次数:966

八臂迷宫(放射臂迷宫(radial arm maze))实验也是常用的评价动物学习记忆能力的模型之一,由Olton等人于20世纪70年代中期建立。其基本依据是,控制进食的动物受食物的驱使对迷宫各臂进行探究;经过一定时间的训练,动物可记住食物在迷宫中的空间位置。该方法可同时测定动物的工作记忆(working memory)和参考记忆(reference memory)。所用动物包括大鼠、小鼠和鸽子。这一模型对脑区毁损和多种药物均很敏感。

(一) 实验设备  实验多数采用八臂放射迷宫,也有采用 十二臂或者二十四臂迷宫。这里介绍上海欣软信息科技有限公司生产的八臂迷宫。每个臂长41.9cm,宽11.4cm,高10.1cm;其上有一透明盖,两侧各有两个相对的光电管。迷宫中央八角形区的直径为27.4cm;上有一透明顶盖。中央区通往各臂的入口处有一活动门,用来对动物的出入臂进行控制。迷宫与计算机相联。也可用摄像跟踪系统(video tracking system)取代光电管来记录动物在迷宫内的活动行为。放置迷宫的房间内有一些外部暗示(extramaze cues)。动物在迷宫内可以看见这些暗示,并借此进行空间定位。实验用大鼠或小鼠进行。

(二)实验方法

1.动物适应实验环境1周后,称重,禁食24小时。此后每天训练结束后限制性地给予正常食料(据体重不同,大鼠16-20g,小鼠2-3g),以使体重保持在正常进食大鼠的80%~85%。

2.第二天,迷宫各臂及中央区分撒着食物颗粒(每只4~5粒,直径约3~4mm)。然后,同时将4只动物置于迷宫中央(通往各臂的门打开)。让其自由摄食、探究10min。

3.第三天,重复第二天的训练。这一过程让动物在没有很强的应激条件下熟悉迷宫环境。

4.第四天起,动物单个进行训练:在每个臂靠近外端食盒处各放一颗食粒,让动物自由摄食。食粒吃完或10min后将动物取出。

5.第五天,将食物放在食盒内,重复前一天的训练,一天2次。

6.第六天以后,随机选4个臂,每个臂放一颗食粒;各臂门关闭,将动物放在迷宫中央;30s后,臂门打开,让动物在迷宫中自由活动并摄取食粒,直到动物吃完所有4个臂的食粒。如经10min食粒仍未吃完,则实验终止。每天训练两次,其间间隔1h以上。

记录以下几个指标:

○1工作记忆错误(working memory errors)次数,即在同一次训练中动物进入食物臂的总次数-1次;

○2参考记忆错误(reference memory errors )次数,即动物进入不曾放过食粒的臂的总次数;

○3总的入臂次数;

○4成功进入潜伏期,即动物di一次进入食物臂的时间;

○5错入潜伏期,即动物di一次进入未放食物的臂的时间;

此外,计算机还可记录动物在放射臂内及中央区的活动情况,包括运动距离和运动时间等。

连续5次训练的工作记忆错误为零、参考记忆错误不超过1次时,可以开始药物测试或脑内核团结构毁损实验。一般先给溶剂(如生理盐水),再给削弱记忆的药物(如东~~~~MK-801等),然后加用增强记忆的药物,剂量由低到高。

更多实验方法请关注公众号:bioviewer

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